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凱(kǎi)氏定氮法是由(yóu)丹麥化學家凱道(dào)爾於1883年建立的。凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件(jiàn)下,用濃硫酸(suān)消化樣品將有機氮都轉變成(chéng)無機銨鹽,然後在堿性條件下將銨鹽轉化為氨,隨水(shuǐ)蒸氣蒸餾出來並為過量的硼酸液吸收,再(zài)以標準鹽酸滴定,就可(kě)計算出(chū)樣(yàng)品中的氮量。由於蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質含量,故此(cǐ)法是經典的蛋(dàn)白質定量方法。

根據凱氏定氮原理測定需要(yào)三個步(bù)驟(zhòu),即消化、蒸餾、滴定。
消化:將含氮的(de)有機化合物(蛋白質)與(yǔ)濃硫酸和催化劑(硫酸銅或凱(kǎi)氏消(xiāo)化片)一同加熱,使蛋白(bái)質分解,其中碳和(hé)氫(qīng)被氧化成二氧化碳和水逸出,而(ér)樣品中(zhōng)的有機氮轉(zhuǎn)化為氨(NH3)並與硫酸結合(hé)形(xíng)成硫酸銨。(銨 NH4+)
消(xiāo)化過程:微火加熱煮沸,燒瓶內物質(zhì)炭化變黑,產生大(dà)量泡沫(mò),泡沫消失後加大火力保持微沸狀態,至液體成藍綠色澄清狀態後繼續加熱 05-1h,結束後冷卻。
蒸餾:得到的溶液(yè)經稀釋定容後加(jiā)入NaOH,蒸(zhēng)餾釋放出NH3,冷凝之後收集於硼酸溶液中。
蒸(zhēng)餾過程:先將消(xiāo)化好的樣(yàng)品進行稀釋(shì),加入NaOH,經(jīng)過加(jiā)熱後產生的氨氣進入冷凝管,經過冷凝之後流入裝有硼酸溶(róng)液的接收瓶(píng)中。形成硼酸銨。(硼酸溶液中加有混合指示劑(jì),形成硼酸銨之後吸收液由酸性變(biàn)為(wéi)堿性,顏色由紫(zǐ)紅轉變為藍綠色。)
滴定(dìng):用已知濃度的(de)鹽酸標準溶液進行滴定,根據鹽酸消耗的量來計算出氮的含量,然後乘以相應的換算因子,即得到蛋白(bái)質(zhì)的含量。(滴定是指一種定量分析的手段,也是一種化學實驗操作。它通過兩種溶液的定量反應來確定某種溶質的含(hán)量,是根據指(zhǐ)示(shì)劑(jì)的顏色變化指(zhǐ)示滴定(dìng)終點,然後目測標準溶液消耗體(tǐ)積,計算分析結果)
滴定(dìng)過程:用鹽酸標準溶液滴入硼酸銨溶液中,使溶液(yè)的顏色由藍綠色變為淺(qiǎn)紅色。
樱桃视频官方版免费版儀器股份根據原(yuán)理研(yán)發(fā)了樱桃视频官方版免费版凱氏定氮儀,產(chǎn)品一經推出便引起了市場關注。
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